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做过Western blot的同学就知道下图的流程，看完此文，你将学会整个WB图片处理（拉直、定量）、做如下A、B两个图，用于SCI投稿：
首先，我们做WB实验，随后将膜放到机器上用Image Lab软件进行曝光，将不同曝光时间产生的SCN图片文件保存到电脑上。
但是我们经常会把这些不同曝光时间的SCN图片文件copy到自己的电脑上，然后再选择一张美观一点的SCN图片文件转换为图片，用于投稿。
所以，上述整个流程做出A和B图，我们自己的电脑一共需要【3款WB必备软件】。
第一，我们自己的电脑需要安装一个“Image Lab软件”。才能将美观的SCN图片文件转换为Tiff图片，用于作图。
第二，我们自己电脑还需要安装一个WB条带定量拉直软件，这个软件是科研必备软件，它可以对条带进行定量和拉直:
第三，我们需要一个WB量化之后做柱形图的GraphPad软件。
所以说，做好WB，我们一定需要这三款软件。这3款WB神器免费分享给大家（原价1899元）：
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那怎么用这3款软件完成WB作图呢？小编来教大家：
一、WB曝光时SCN图片文件转换为Tiff图片：
如下方式直接用Image Lab(此次资源里面包括了Win和Mac的安装包)打开一张背景低、条带平的SCN图片文件，并保存（左上角按钮）为tiff图片，这样就ok了。
二、WB蛋白条带定量、拉直：
1、WB条带定量。接上，Image Lab导出图片之后，四个泳道，我感觉内参不平（所以我需要量化它，并调整内参）：
那我们将这张图片拖到WB条带定量拉直软件（此次资源包里面包括了Win+Mac的安装包）中，打开这张图：
a. 把图片转化成灰度图片：Image>Type 选16-bit：
b. 消除背景影响：Process>Subtract Background. 选择50基本可以。
c. 框中条带：如下选择你需要定量的条带：
d. 选择条带，如下操作后点击YES:
e. 可视化条带：
后跳出可视化页面：
f.框出想要量化的孔：如下操作，按住电脑的shift键，然后用鼠标划线：
g.定量：选择量化棒，用鼠标点击每一个框：
随后会跳出量化的结果：
导出为Excel即可。同时，这个值除以原始上样量就是浓度了，随后我们再用一个统一的值除以浓度，就是调整后的每一个孔道的上样量了：
此外，定量之后，我们还可以用量化图做目的蛋白的柱形图，如下计算好目的蛋白的值和内参的值，目的蛋白除以内参就是量化值：
我们可以看到实验组的WNT4蛋白量明显高于对照组。
2.拉直。
还是一样，我们用WB定量拉直软件打开弯曲的WB图片：
随后沿着弯曲的线划线：
再用鼠标双击Segmented line选项，设置线段的宽度至包含所有条带：
点击菜单栏Edit-Selection-Straighten，倾斜的WB条带立刻被拉直，并保存为新的图片：
三、WB量化柱形图：
给大家分享的Graphpad安装包是Win版的，自带激活的，是我们机构批量授权的，永久免费使用的。那我们接着上述做图，我们打开Graphpad，如下：
将我们的值复制进去：
如下点击出图：
再双击修改颜色就行：
最后如下点击非配对T检验进行差异分析：
结果是四颗星：
再把scale bar加上：
最后导出投稿就行：
好了以上就是做WB的3款必备软件，科研必备！
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那现在孟德尔发文速度最快，也最简单，因为很热门。拿一篇简单的孟德尔随机化论文给大家看看，如下。分析肺组织中各种lncRNA表达量与肺癌的因果关系的研究，就是一篇中华牌论文：
非常简单，5分钟可以搞定。最终说明了肺组织中3个lncRNA的表达水平与肺疾病有着因果关系：
有了这个思路，你还做什么基因敲降、过表达对疾病的影响？直接孟德尔分析不就行了吗？值得注意的是，我们加大难度，发高级SCI，按照这个套路可以分析：任意组织中任意基因的表达水平与任意疾病的因果关系。分分钟就是一篇Nature。
所以，今天我们要给大家免费分享一套资源【基因表达水平与疾病的因果关系孟德尔随机化分析发SCI实操课】，非常简单，代码也是万能的，你一键就可以得到：49个组织中任意基因的表达水平与任意疾病的因果逻辑关系。有了这个结果，分分钟就是一篇Nature。资源如下：
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有课件，有代码，有实操，有参数讲解，非常适合想极速发表SCI的同学。资源中包括了所有组织的原始数据（小编都已经给大家下载好了，不用因为网速不好做不了孟德尔啦），课程是基于本地数据进行孟德尔随机化分析的。
实操视频如下：
所有的孟德尔随机化本地分析需要的原始数据如下（部分截图）：
代码也是齐全的（部分截图）：
总而言之，有了这个课程和代码和原始数据，你一键就可以得到：49个组织中任意基因的表达水平与任意疾病的因果逻辑关系。有了这个结果，分分钟就是一篇Nature。
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