MALDI Biotyper Maintenance -- 靶板清洗

科技   2024-04-10 08:08   北京  

MALDI Biotyper Maintenance  靶板清洗 

Bruker MBT微生物鉴定系统对于样本的需求量小,操作简便,可重复使用的不锈钢靶板也使得微生物鉴定成本大大降低,这无疑是实验室用户的福音,但如果实验后没有严格按照SOP流程清洗靶板,残留物质会造成异常的MBT鉴定结果。



靶板残留物质影响:

如图1:靶板清洗不干净导致鉴定得分较低。



如图2. 靶板清洗不干净导致鉴定结果一致性较差,提示混合菌。




靶板清洗操作流程:

 80%三氟乙酸可以有效清除靶板上残留的蛋白质及多肽等物质,三氟乙酸清洗不锈钢靶板的标准操作流程(SOP)如下:


1. 将MALDI靶板放置到合适的容器中(如培养皿或不锈钢器皿),倒入足够量的70% 乙醇水溶液浸没MALDI靶板。室温下浸泡5分钟;

注意:切勿长时间浸泡,防止靶板背面磁铁脱落。

2. 取出MALDI靶板,在流动的自来水下彻底冲洗;

3. 使用Kimwipe无尘纸,用70%乙醇水溶液彻底擦洗MALDI靶板;

4. 用自来水冲洗MALDI靶板,再用Kimwipe无尘纸擦干;

5. 用移液枪转移100-200 μL 80%三氟乙酸水溶液覆盖MALDI靶板,并立即用 Kimwipe无尘纸用力擦洗所有MALDI靶位;

注意:三氟乙酸有挥发性和强腐蚀性,覆盖靶板后应立即擦拭,防止过度腐蚀靶板表面。

6. 用去离子水冲洗MALDI靶板,再用Kimwipe无尘纸擦干;

7. 在室温下晾干MALDI靶板至少15分钟,完全干燥;

8. 清洗后的MALDI靶板,请存放于靶板盒中。 


靶板清洗标准溶液配置:

 配制 70%乙醇水溶液:

 (1) 用量筒量取 30 mL 去离子水。

 (2) 将量筒中的水转入烧杯。

 (3) 用量筒量取 70 mL 无水乙醇,然后转入到烧杯中。

 (4) 将混合液从烧杯转入量筒,再从量筒转入烧杯,形成均匀的混合溶液。

 (5) 重复第 4 步五次,即可使用。


 配制 80%三氟乙酸水溶液:

 (1) 将 50 μL 去离子水转入至 1.5 mL Eppendorf 塑料管中。

  (2) 小心地添加 200 μL 100%三氟乙酸,盖紧管盖。(注意:请在通风橱内操作)。

  (3) 将混合液涡旋震荡 1 分钟,即可使用。

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