MALDI Biotyper ——
严谨的质量控制，可靠的测试结果
布鲁克微生物质谱具有操作简便、快速、准确、灵敏、自动化及高通量等特点，在提高科室微生物检测能力的同时，严谨的质量控制标准也保证了仪器测试结果的准确性。BTS（Bacterial Test Standard）由大肠杆菌提取物和添加的两种高分子量蛋白质组成，专门用于MALDI Biotyper系统的质量控制。覆盖了MALDI Biotyper微生物鉴定所涉及的蛋白质的全部质量范围，实现了BTS与 MALDI Biotyper质谱系统的完全契合。
Step.1 --- BTS的溶解
1. 在室温下将50μL标准溶剂加入到装有细菌试验标准品固体颗粒的管子中，上下吹打至少20次，使其溶解，注意避免溶液起泡；
2. 在室温下放置5min，再次上下吹打混合至少20 次；
3. 在室温下，离心机转速13,000rpm离心2min；
4. 移取5μL上清液分装置于EP管中，并使用封口膜封好；
5. 在-18℃ 或更低温度下存放分装液；
Step.2 --- 使用BTS校准质量轴
★ 通过8个质量数实现了质量轴2000-20000的完整覆盖，准确的质量轴是获得可靠结果的重要前提；
★ 先将1 μL的BTS溶液点在靶板的空白位置上，在室温下晾干后，再点 1 μL HCCA 基质溶液，等待完全晾干即可。
第一步：选择质量校准文件MBT_Standard
第二步：采集并累加到合适的谱图后，点击 < Automatic Assign > 按钮，进行自动标峰校准，确认误差均在±300 ppm以内，点击 < Apply >
如果较长时间没有校准仪器，质量偏差过大，不能自动指认校准峰，应进行手动指认。为防止手动选错峰，可以先选m/z 16952，m/z 13683和m/z 6255三个峰进行校正，然后再用 < Automatic Assign > 再次校正，如下图所示：
手动确认三个峰成功后，需再次点击< Automatic Assign > 进行自动校正，每个峰值的最大偏差 Err/ppm 都应在±300ppm以内，校准完成，如下图所示：
Step.3 --- 自动进行QC和样品分析
★ 启动MBT Compass软件，点击或者拖拉选中BTS和样品所在的靶位，然后点击鼠标右键，选择 Add Samples.
★ 在样品类型下拉菜单中选择对应的样本类型 Sample Type（下图中，红色方框所示）：在左侧方框勾选即为BTS质控位，普通样品为Standard，血培养样品为Sepsityper，丝状真菌为Filamentous Fungi，分枝杆菌为Mycobacteria；
★ 在ID栏中（下图中，红色方框所示），扫码或人工输入所有样本的编号ID，用鼠标左键点击“Start Acquisition”按钮（下图中，右下角绿色方框所示）
★ QC过程大约需要5分钟，在软件左下角中有进程显示（如下图红色框所示）完成后自动进行样品分析
★ 如果QC未通过，则会自动停止分析，并提示“QC失败”
★ 如果提示“QC 失败”，请参考以下几点，排除故障后重新进行分析；
1. 检查结晶状态，如果结晶稀疏，大小不均匀，考虑配制新鲜的BTS和基质液以获得最佳图谱
2.检查峰强度，BTS在40 shots时的峰强度在6000-8000为最佳，240 shots叠加应在20000-30000，超过35000可能也会导致QC的失败；如果峰强度不够，可适当增加检测器电压和激光能量来获得最佳响应；
3.如果仍然无法通过QC，可能需要对参数进一步的优化，请联系我们的工程师来远程帮您诊断；
布鲁克（北京）科技有限公司
地址：北京市海淀区西小口路 66 号
中关村东升科技园
客户服务电话：400 810 1099
https://www.bruker.com
