SINH
所级公共技术中心
流式细胞专业技术平台
使用推荐
中国科学院上海营养与健康研究所所级公共技术中心流式细胞专业技术平台配备了流式细胞分析仪Beckman Cytoflex LX、Beckman Cytoflex、BD LSR Fortessa，流式细胞分选仪Beckman Moflo Astrios 、BD FACS AriaIII等及配套前处理仪器设备，可以满足科研流式分析和分选需求。
平台拥有实体组织免疫微环境的检测方案：T细胞、B细胞、NK细胞、DC细胞、巨噬细胞、MDSC、调节性T细胞、以及胞内/核内转录因子等；细胞因子如炎症因子、白介素因子等定量分析检测方案；人、小鼠、大鼠、犬、食蟹猴等多种属实验方案设计、方法开发以及检测经验，为新药早期研发提供准确可靠的实验数据；脆弱细胞分选经验，为单细胞测序提供高质量的样本；极低含量单细胞索引分选经验，为单抗药物研发成功筛选抗原特异性单个B细胞。
具体流式仪器，联系方式如下：
服
务
内
容
1.肿瘤浸润淋巴细胞及细胞因子表达检测
肿瘤浸润淋巴细胞（Tumor Infiltrating Lymphocytes，TILs）是一种存在于肿瘤微环境中的免疫细胞，主要包括T细胞，B细胞，巨噬细胞，NK细胞等。这些细胞直接或间接参与免疫反应，影响肿瘤的生长和治疗效果。
肿瘤浸润淋巴细胞会产生细胞因子，如IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-12等，这些细胞因子可以调节免疫细胞的激活和增殖并招募其他免疫细胞进入肿瘤部位，在调节针对肿瘤的免疫反应中起到重要的作用。通过流式细胞术可以对肿瘤微环境以及外周血中的免疫细胞以及细胞因子进行高通量分析，揭示免疫治疗药物的生物学效应，评估免疫治疗的疗效。
技术优势
1）平台流式分析仪Beckman Cytoflex LX，5激光18色，分辨率高、灵敏度高、软件操作简便，配备了多孔板自动上样，可快速大量的采集细胞，结果稳定可靠；
2） 平台配备实体组织解离全套设备和抗体设计方案，具有全流程技术服务能力。
结果展示
图1. 小鼠肿瘤浸润淋巴细胞tSNE分析
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2.外周淋巴细胞及髓系免疫细胞分析
通过对外周免疫细胞精细分型检测，可深入地了解机体免疫功能状态，例如确认感染性疾病及机体的免疫反应强度、评估机体免疫功能（缺陷、机能低下、亢进）；辅助临床药物研究，例如借助灵长类动物辅助判断免疫缺陷、自身免疫性疾病或辅助发现一些血液病；还可用于研究接种疫苗后的免疫应答情况，或者评估抗癌药物对肿瘤细胞的影响。
技术优势
1）具有专业的配色及方案设计；
2）抗体滴定配色及染色方案优化；
3）设置合适的单染对照及FMO对照；
4）选择正确的门控策略；
5）合适的质量控制。
结果展示
图2.流式抗体滴定和食蟹猴外周血T、B、NK、Tfh细胞分析
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3.细胞因子定量检测
微球免疫分析系统CBA（Cytometric Bead Array)是基于流式细胞技术的多重蛋白定量检测方法，能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。尤其能对稀有样本、少量样本中的细胞因子、抗体、抗原等指标进行检测。本平台可以提供基于流式CBA、ELISA的高参数细胞因子检测服务。该技术应用领域广泛，如免疫功能性分析，免疫治疗药物和疫苗的药效评价；肿瘤免疫相关机制以及信号通路的研究；细胞信号传导相关磷酸化蛋白分析，凋亡相蛋白定量分析，干细胞研究和干细胞治疗检测等。
技术优势
1）需样本量少，每次检测仅需15uL-50uL样本；
2）灵敏度高，分析精度可达到pg/mL；
3）实验时间短，通常3-4小时可完成实验；
4）实验方案灵活，支持个性化订制，最多可同时检测30种蛋白；
5）实验结果可靠，可重复性高。
结果展示
图3. 细胞因子定量分析
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4.流式分选
流式分选（Fluorescence-Activated Cell Sorting, FACS）是一种强大的工具，在单细胞测序中起着至关重要的作用。通过流式分选，可以根据细胞表面标志物（如特定的抗原表位）将不同类型的细胞分离出来，例如分离出T细胞、B细胞、巨噬细胞等免疫细胞，或者分离出神经元、星形胶质细胞等神经系统细胞，还可以进行稀有细胞捕获、细胞活/死分离、细胞大小和形态分离等。
技术优势
1) 速度快，每秒可达7000-20000个。
2) 同时分离多种细胞类型
3) 可以把细胞精确分离到96孔或384孔多孔板内，数量自定义。
结果展示
图4.心脏内皮细胞细胞亚群流式分选后进行10*Genomics聚类分析
送
样
建
议
推送部门：科技条件处
撰稿人：邱琳、缪祥
编辑排版：刘一凡
