前两天有小伙伴要质粒构建的相关实验技术,于是一不小心把之前上学时候录的载体构建的基本实验技术的视频给翻了出来,遂擦了擦灰,分享给老铁们,那时候毕竟实验是小白+的水平,有做的不对的地方还望各位老师忍痛看看,不好的地方就当反面典型好了!
原理
首先利用低熔点琼脂糖凝胶电泳DNA片段,分离目的条带DNA,然后紫外光下切割含目的DNA条带的胶块,利用胶回收试剂盒回收纯化DNA片段。试剂盒的胶回收柱采用特殊硅基质材料在一定的高盐缓冲系统下高效、专一地吸附DNA、RNA的原理,配备设计独特的离心吸附柱式结构,使用常规台式高速离心机,在短时间之内即可以高效回收核酸片段。
切胶
二 、连接转化
实验准备
(1)准备冰盒
(2)编辑连接程序
(3)准备连接用的试剂和PCR管
(4)打开水浴锅并调节温度到42 ℃
(5)准备好超净台
三、涂板
实验前准备
(1)准备好超净台
(2)将涂板用到的玻璃棒用酒精灯灼烧
(3)打开培养箱,将固体LB培养基预热
涂板
四、挑菌
实验前准备
(1)准备好超净台
(2)准备好灭菌的试管和试管塞
(3)预热液体LB培养基
挑菌