1、基本原理
新鲜土壤经氯仿熏蒸(24h) 后，被杀死的土壤微生物量碳、微生物量氮，能够以一定比例被0.5 mol/LK₂SO₄溶液提取并被定量地测定出来，根据熏蒸土壤与未熏蒸士土壤测定的有机碳、氮量的差值和提取效 率(或转换系数kEc), 估计土壤微生物量碳、微生物量氮等。
2、土壤样品
土壤样品要有代表性，避免在秸秆还田或有机肥施用后的1个月内采样。
土壤样品要求新鲜、不可冰冻、含水量适中(大致为田间持水量的60%),过2mm筛。
对于风干土壤样品，可以调节土壤含水量为田间持水量60%左右，在室温下黑暗环境中预培养7d~10d,过2mm筛 。
3、操作步骤
称取相当于25.0g烘干土重的湿润土壤3份，分别放入3个100 mL 小烧杯中，一起放入同一真空干燥器中。干燥器底部放置几张用水湿润的滤纸和分别装有50mL NaOH溶液、一定量蒸馏水的小烧杯。将装有约50mL的无乙醇氯仿的小烧杯(同时加入少量抗暴沸的物质)放入干燥器底部，用少量凡士林密 封干燥器。将真空干燥器和真空泵放在通风橱内，用塑料管连接真空干燥器和真空泵，打开真空泵对真空干燥器进行抽气，至氯仿大量冒气泡，并保持至少2 min。关闭干燥器阀门，断开真空干燥器与真空泵的连接管。将真空干燥器放在25℃、黑暗的培养箱中24 h。称同样质量的土壤3份，不进行熏蒸处理，放入另一个真空干燥器中，同样在25℃的黑暗条件下放置24 h,作为土壤对照。另称取土壤用烘干法测定土壤含水量。
熏蒸结束后，将真空干燥器放在通风橱内，慢慢打开通气阀门，让外部空气进入真空干燥器。小心打开真空干燥器的上部封盖，取出装有水和氯仿的烧杯，氯仿倒回瓶中可重复使用。擦净干燥器底部的水，用真空泵反复抽气，直到土壤闻不到氯仿气味为止。将烧杯中土壤全部转移到250mL的三角瓶中，加入100mL K₂SO₄ 溶液，在振荡机上振荡浸提30 min(25℃)。用定量滤纸过滤。对照土壤同上用K₂SO₄ 溶液浸提。浸提液立即测定或在一15℃下保存。
如浸提液经过冰冻保存，需经过室温完全融化后备用。
按 TOCN仪操作说明吸取一定量浸提液，放入自动进样器进行TOC和TN测定。如需稀释，应用高纯水进行稀释，稀释倍数要适中。
（以上测定方法参考：NY/T 1119—2019）
