研究发现在山羊肌肉组织中差异表达lncMD1,在肌肉分化阶段高表达,通过体外细胞实验进一步证实其能促进山羊骨骼肌卫星细胞(SMSCs)的分化进程。
为进一步解析lncMD1对山羊SMSCs增殖分化的作用机制。采用双荧光素酶实验证明lncMD1可以充当miR-133a-3p和miR-361-3p的分子海绵。通过体外实验,设计合成miRNA模拟物和抑制剂转染进山羊SMSCs内,实验发现miR-133a-3p和miR-361-3p对山羊骨骼肌卫星细胞的分化存在抑制作用。为了探讨miR-361-3p和miR-133a-3p调控山羊肌肉干细胞发育的机制,本文利用了在线软件工具来预测候选靶基因。重叠的预测结果确认了DCTN1/DCTN2基因作为miR-361-3p/miR-133a-3p的潜在靶标。进一步研究显示,在分化阶段DCTN1/DCTN2的表达明显高于增殖阶段。抑制DCTN1/DCTN2后分化相关基因的表达水平显著下降。结果表明,miR-361-3p/miR-133a-3p可以通过DCTN1/DCTN2来影响山羊SMSCs的分化。
综上所述,lncMD1作为竞争性内源性RNA,通过负向调节miR-133a-3p/miR-361-3p并上调miR-133a-3p和miR-361-3p的靶基因DCTN2/DCTN1的表达。
安徽农业大学为本文的第一通讯单位,凌英会教授为论文的通讯作者,博士生敬敬为论文第一作者。本研究得到国家自然科学基金(32172695,32372832),安徽省重点研发计划(2023z04020003)以及国家肉羊产业技术体系(CARS-38)等项目经费的资助。
链接:https://authors.elsevier.com/sd/article/S0141-8130(24)06616-9