移液器在实验室中起着关键作用,用于精确测量和转移液体。正确操作移液器对于确保实验结果的精确性以及操作人员的安全性至关重要。因此,理解和遵循正确的操作指南和注意事项是必须的。
移液器通过活塞的运动来实现吸取和释放液体。活塞在通过弹簧的弹性作用下,进行缩放运动,从而达到吸液和排液的目的。当活塞向上移动时,它排出一部分空气,利用大气压力吸入液体;而当活塞向下压时,便推动空气,使液体排出。通过配合弹簧的特性,使用者可以有效地控制液量的速度和力度。
移液器的操作体积范围通常在其标示量程的10%到100%之间。虽然这个范围是可操作的,但在减少设定体积时,性能指标可能会发生变化。假设一个100微升的移液器,当操作体积在量程的50%到100%时,其准确性能够达到±0.8%的范围。然而,当尝试移取10微升(即量程的10%)时,其不准确度可能会显著提升,达到原来的约三倍,即2.5%至3%。
为了获得最佳的操作效果,建议在标示量程的35%至100%范围内使用移液器。通常不建议将体积设定在其最大容量的10%以下。对于需要处理小体积液体的情况,应选择合适的小量程移液器以确保准确性。
确保吸头浸入液体的深度适当,对于提升移液的准确性至关重要,尤其是在使用小量程移液器时。针对不同容量的移液器有以下浸入深度建议:
小容量移液器:吸头应浸入液面下1-2毫米。 大容量移液器:浸入深度应控制在6-10毫米。 若吸头浸入过深,吸头内部的空气可能被压缩,从而导致吸入过多液体。这不仅影响了移液的准确性,还可能在吸头表面残留液体,进而影响实验的结果。反之,若吸头浸入不够深,可能会吸入空气,形成气泡,从而导致移取体积不准确。
适度浸入:根据移液器的类型调整吸头浸入液体的深度。 避免过深:防止空气被压缩而导致液体过量吸入。 防止气泡:确保吸头充分浸入,以避免吸入空气和气泡的形成。
在进行液体吸取操作时,确保吸头与液体样品垂直对齐是提高准确性的关键因素。具体操作建议如下:
垂直浸入:在吸取液体过程中,尽量使吸头保持90度角垂直于样品液面。 角度控制:避免吸头偏离垂直位置超过20度,以确保移液的准确性。采用垂直角度吸取液体能够提升约2.5%的准确性。
如果吸头偏离垂直位置超过20度,可能会导致吸取量的不准确,进而吸入过量液体。例如,以60度角浸入样品可能导致吸取液体量超过设定值的0.7%。因此,保持吸头与样品的垂直关系非常重要,以确保实验结果的可靠性。
为了获得更理想并具高重复性的实验结果,保持一致的移液节奏和速度是至关重要的。以下是一些具体的操作建议:
保持节奏:在移液过程中,确保操作节奏的一致性,避免突然改变速度或停顿。 控制速度:在整个移液过程中,保持速度的一致性,不宜过快或过慢,以确保较高的准确性和重复性。
通过以上方法,可以有效地减少误差并提高实验结果的可靠性,尤其在需要多次重复操作时更显重要。保持吸液的一致性有助于实现更高精度的实验结果。
正确识别润洗吸头的适用场景,对于提高移液的准确性是至关重要的。以下是一些具体的操作建议:
润洗吸头:在某些情况下,润洗吸头2-3次可以在吸头内形成一层同质膜,从而提升移液准确性约0.2%。这主要是因为润洗有助于中和微量液体中的毛细效应,对于大体积移液来说,这可以使吸头内温度与样品温度一致。 注意事项:需特别注意的是,在处理热的或冷的溶液时,润洗可能会对移液的准确性产生负面影响。例如,当从冰浴中汲取液体或者当溶液温度超过37摄氏度时,润洗可能导致高达5%的误差。
润洗吸头的具体方法是将吸头浸入液体中,反复按压活塞按钮2~3次。这种方法适用于提高移液的准确度,但需根据实际情况和样品性质慎重选择使用。
在进行移液操作前,务必确保移液器准确无误,这包括检查刻度的正确性、观察液面位置以估算准确度、确认是否漏液以及检查吸排液体的顺畅性。
移液器的使用大致分为以下几个步骤:
定容量:根据需要吸取的液体体积选择适当的量程。避免使用大容量的移液器来吸取小量液体,应选择最大量程接近所需的移液枪。调节容量时,从大到小逆时针旋转刻度即可,而从小到大可先顺时针调节后再回到设定值以确保精确度。 安装枪头:对单道移液枪,端头垂直插入吸头并轻压微转以固定;对多道移液枪,将各吸头倾斜插入并稍微摇动进行固定。避免暴力操作以免损害移液枪。 润洗枪头:对于粘稠液体,通过润洗使吸头内壁形成液体膜达到精确移液。如是有机溶剂或易挥发液体则需润洗多次,高温或低温液体不建议润洗以免吸头变形。 吸取液体:有正向和反向吸液方法。正向吸液按下第一档吸取、放液按第一再第二档;反向吸液时始于第二档,多吸入少量液体,适用于粘稠或易挥发液体。操作时需缓慢而均匀,吸头垂直且浸入深度适中。 排出液体:将吸头尖靠在容器内壁轻排,如液体量特少,则直接置于液面下以避免沾到容器壁上。非粘稠或易挥发液体时,确保彻底排出后才移动移液枪。 退枪头:按下吸头脱卸按钮,弃置用过的枪头。
遵循这些步骤能有效确保移液操作的准确性和重复性。
为了保持移液枪的最佳性能并延长其使用寿命,以下是一些维护和保养的建议:
弹簧保护:在不使用移液枪时,应将量程调至最大值,以使弹簧保持松弛状态,避免长时间承受压力而导致失效。 定期清洗:建议定期对移液枪进行清洗,使用肥皂水或60%异丙醇进行消毒清洗,然后用蒸馏水彻底冲洗,确保内部残留物被清除,并自然晾干,以避免腐蚀和细菌滋生。 高温消毒:在进行高温消毒前,务必确认移液枪能够经受高温处理,以免对设备造成损坏。
通过遵循这些维护和保养建议,可以有效地延长移液枪的使用寿命和保持其移液精度。
在使用移液器时,了解并正确处理可能出现的故障是确保实验顺利进行的关键。以下是常见故障及其原因分析:
排液不尽:当吸头顶端残留少量溶液时,通常原因在于吸头不匹配。吸头口部过大可能导致与移液枪之间的密封性减弱,降低内部压强,从而引发吸头脱落、残液积留及吸液不准等现象。因此,在使用移液枪时,务必要选择与之相匹配的吸头,避免无效实验数据的产生。 吸液量变小、吸液费力:若出现吸液量下降或操作费力的情况,应检查移液器是否有堵塞现象。如有堵塞,需要及时拆开进行清洁。移液枪内部的组件可能已受污染,建议清洗和消毒活塞、吸嘴等,并视情况进行灭菌操作,以防影响到后续实验。 吸液量超过限定量程:这种情况通常由于量程锁故障导致。移液枪用户无法自行维修此故障,请及时联系售后服务人员以进行检修。 移液枪卡顿或退吸头困难:移液枪内部活塞磨损或润滑不足可能引起卡顿。而内部液体浸入也会导致类似问题。如果退吸头装置异常或弹簧受损,则退吸头过程会变得困难,同时移液器变得不灵活。
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