【前言】
目前糖化血红蛋白(HbA1c)测定的方法有多种,如:离子交换层析、常规电泳法、等电聚焦电泳、亲和层析、免疫测定、比色法、分光光度法、质谱。
在离子交换层析法中,有阳离子交换树脂微柱法、低压液相层析(LPLC)、高效液相层析(HPLC)。
离子交换HPLC法是测定HbA1c的金标准,但是工作中也发现有些异常的糖化血红蛋白结果,究其根本,均是异常血红蛋白所致。
而我们知道,异常血红蛋白比较常见的就是地中海贫血,对于这个疾病,血片中可以发现一些端倪。
【案例经过】
9月20日,生化同事发现某门诊患者,男,47岁,临床诊断:慢性结肠炎,其糖化血红蛋白结果的曲线有异常。
单纯看数值,仪器给出的结果是,HbA1c 7.9%,属于一个偏高的水平,参考范围是4.0%~6.0%。
如果只从LIS界面去审核报告,那很很可能会审核出去,毕竟我们用的是高效液相色谱法,结果准确性杠杠的。
当然细心的老师,会对比一下当日空腹血糖结果,该患者当日空腹血糖 4.54mmol/L。
糖化血红蛋白反映的是2~3个月的平均血糖水平,莫非患者是一个既往糖尿病患者?
还是近期坚持服用了降糖药,导致检测当日血糖正常?
我们来看看它的测定曲线。
【案例分析】
1、后续患者并未做地中海基因筛查检查。但通过血片形态,我可以锁定地中海贫血方向,且是地贫携带可能性。
缺铁性贫血一般不会有靶形红细胞与豪焦小体。
巨幼细胞性贫血一般MCV会增大,大于110fL,或者可见多分叶核的中性粒细胞。也有例外的,MCV 正常的巨幼细胞性贫血,少见就是。
2、既然本案例的色谱法糖化血红蛋白结果不可信,我们还有免疫胶体金法的糖化血红蛋白。
试剂如下。
一测试,患者糖化血红蛋白结果为4.1%,跟当日空腹血糖结果接近。
最后我们报告的是糖化血红蛋白4.1%。
所以,任何一种检测方法学并不是100%完美的。
之前我们都是诟病胶体金法的试剂,敏感性、准确性差,但真正遇到一些疑难的标本时候,胶体金法还是有其自身的优势。
这里额外举个例子,做胃液的隐血,镜下可见影红细胞,但胶体金法的试剂就是阴性,即便稀释几倍还是阴性,拿尿液试纸条测就是阳性,再用化学法检测(甲苯胺蓝,免疫室的底物AB液)也是阳性。
3、怎么理解本案例的糖化血红蛋白受干扰呢。
正常的血红蛋白是由4条珠蛋白肽链合成,这4条肽链分别是2条α链和2条β链组成。
高效液相色谱法测糖化血红蛋白,检测正常人群时候,由于珠蛋白链都是正常的,没有缺失,没有异常错位,结果自然可靠。
但是遇到地中海贫血患者,其α链或β链合成是异常的,仪器有时候会把这些异常血红蛋白结果计算到测试标本中,自然测出来的糖化血红蛋白结果会被假性升高。此时需要查看糖化血红蛋白图谱才能发现。
当然也有可能,地中海贫血患者也有测不出来糖化血红蛋白结果的,工作中我们也遇到过。
另外还有一个异常的,就是糖化血红蛋白结果结果很低很低的,考虑溶血性贫血所致,红细胞寿命很短,基本全部被破坏了,仪器就测不到那些链,因为我们仪器是吸取全血标本测试,需要经过多道程序洗脱才呈现图谱峰值。
好了,以上就是今天的内容~
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