作者探讨了在蛋白质工程中识别和分析热点的多种方法，以增强酶的功能。方法包括：利用多序列比对识别保守或非保守位点进行突变；通过核磁共振光谱分析化学位移扰动，识别有益突变位点；通过蛋白-配体相互作用分析，定位关键残基；研究酶的构象动态，尤其是环区的柔性，以指导酶的设计（表1-2，图3）。
为了将自然催化与合成化学需求对接，研究人员将人类发明的化学反应引入酶中，虽然计算机辅助的酶设计受限于对序列-功能关系的理解，但对现有酶进行工程改造已取得显著成功。例如，通过工程改造的ThDP依赖酶实现了不对称自由基转化，改造的CHMO酶催化了α-氟酮的对映选择性合成，改造的肌红蛋白催化了不对称的内酰胺化反应，以及改造的柠檬烯环氧化物水解酶催化了Baldwin/反Baldwin反应。这些成功的案例展示了酶工程在实现新催化功能方面的潜力（图5）。
作者信息及链接：
孙周通：sourcedb.tib.cas.cn/cn/expert/rckyjy/201609/t20160918_4664103.html
研究方向：围绕工业酶设计与绿色生物催化，重点开展酶分子工程、化酶催化工程、生物合成工程等方向的基础与应用研究
文章信息：Rational enzyme design by reducing the number of hotspots and library size
文章链接：https://doi.org/10.1039/D4CC01394H
