背景
毛霉菌病是一种罕见、凶险的机会性真菌感染，常继发于糖尿病酮症酸中毒。此病临床症状、辅助检查缺乏特异性，故临床诊断存在挑战。目前能够确诊毛霉菌病有真菌培养法、直接涂片法、组织病理活检及新兴的分子生物法等，但是临床常用的细胞学检查及组织病理活检。在细胞学诊断毛霉菌是相对少见的。
本文报道一例通过传统细胞学涂片、液基细胞学、细胞蜡块观察到毛霉菌并诊断肺毛霉菌病，比较毛霉菌在不同细胞学检查的形态学差异，熟悉这些生物体的细胞形态有助于正确诊断这种疾病。
案例展示
液基细胞学：大量炎细胞及坏死的背景中，同样可以更明显更清晰观察到不规则丝条状菌丝，菌丝较粗，一般扭曲、折叠在一起，分支不规则，呈90°角。
细胞蜡块
组织学活检：低倍镜下，支气管黏膜伴大量炎症及坏死，部分支气管黏膜的假复层纤毛柱状上皮坏死、脱落，坏死区域内可见大量菌丝。高倍镜下清楚观察到折叠、起皱或肿胀宽管状的菌丝（宽约10-15μm），无序的菌丝很少出现分支，少部分可见从侧壁分离的直角分支，其余可见横切的圆形、椭圆、多边形的无分支囊性菌丝。过碘酸希夫 (PAS) 染色显示粉红色菌壁的菌丝。Grocott染色显示棕黑色菌壁的菌丝。
最终，结合传统细胞学涂片、液基细胞学、细胞蜡块及组织病理活检均观察到宽而管状的菌丝，诊断为肺毛霉菌感染。
讨论
毛霉菌病是一种危及生命的血管侵袭性真菌感染，目前能够确诊毛霉菌病有真菌培养法、直接涂片法、组织病理活检及新兴的分子生物法。真菌培养法特异性高，但其敏感性不足50%；新兴的分子生物学方法，基于血清或组织的定量聚合酶链反应（PCR）可很好地应用于毛霉菌的分子诊断技术中。基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱（MALDI-TOF）似乎是另一种从培养物中识别霉菌的具有高准确度的工具。血宏基因组学第二代测序（mNGS）有可能从血液样本中检测出侵袭性霉菌感染，并有望对这些感染进行早期诊断，但现阶段仍未成熟且成本过高，目前仍未广泛应用于临床。
目前临床常用的、最直接、最经济的确诊检查手段仍是细胞学检查及组织病理活检。组织病理活检是比较常见的，在细胞学诊断毛霉菌相对少见。
在常规细胞学涂片中，巴氏染色涂片见菌丝呈红色，宽，呈带状，有折叠，波状和褶皱似海带样，菌壁为均一红染，无空白区，少分隔，分支夹角约90°。而肺泡灌洗液基细胞学检查见则可以更明显更清晰观察到丝条状菌丝，菌丝较粗，一般扭曲、折叠在一起，分支不规则，呈90°角。
细胞蜡块和组织活检病理可以更明确鉴别出真菌感染，同时能直观看到毛霉菌的血管侵犯；菌丝宽（5～20μm）、薄壁、不规则带状菌丝，很少分隔（pauciseptate），分支不规则且无固定角度；横切则呈囊性，很少见到孢子。菌丝H&E染色可能只显示细胞壁，内部没有结构，Grocott 甲胺-银 (GMS) 和过碘酸-希夫 PAS 染色能把真菌壁分别染成紫红色和棕黑色，从而更有利于显现菌壁结构。
在细胞学鉴别诊断方面，主要与其他真菌感染进行鉴别诊断，如曲霉菌、念珠菌、隐球菌。一般来说，念珠菌菌丝体很薄（直径2-4μm），常呈珠状，而曲霉菌丝体中等厚度（直径5-10μm），厚度均匀，通常表现出锐角分支。隐球菌呈圆形，无分支。
总之，细胞学检查是一种快速、可靠的替代诊断工具。呼吸道样本的传统涂片检查有助于检测毛霉菌，但其诊断敏感性较差。液基细胞学玻片显示出比传统涂片更高的毛霉菌阳性率。在液基细胞学玻片中观察到更清晰的细胞背景和更明显的立体细胞病理学特征。也有研究表明液基细胞学可作为一种快速有效且无创的替代组织病理学方法用于毛霉菌的诊断，与组织病理学的敏感性（75.9%）相当。
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