鸡只免疫是预防疾病的重要手段,而抗体检测是评估免疫效果的关键。抗体检测的主要作用有:检查免疫效果;掌握鸡只抗体变化规律,确定最佳免疫时机;检查疫苗质量;疾病诊断的辅助手段。
一、抗体检测的种类
在日常生产中,采用的抗体检测方法有红细胞凝集抑制试验(HI)、琼脂扩散试验(AGP)、酶联免疫吸附试验(ELLSA)等。
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红细胞凝集抑制试验(HI)
用于新城疫(ND)、禽流感(AI)、减蛋综合症(EDS76)的抗体检测和疾病的辅助诊断。
HI检测程序制定的原则
·1日龄检测(新城疫、禽流感),掌握雏鸡母源抗体水平,确定免疫时机。当前大多数规模场没有此程序。其实做好一日龄检测对确定鸡群首免意义重大。防疫太早,正好赶在母源抗体较高时期,会对疫苗产生感染,效果不好。防疫太晚,母源抗体消失较早,容易进入免疫空白期,抗体低,产生应激大,易发生呼吸道疾病等。
·免疫当天检测,掌握免疫前鸡只的抗体水平,便于确认免疫效果。如果免疫效果差,可以进行初步判断,排除操作手法、免疫时间、疫苗剂量、疫苗质量、鸡群应激等因素。
·活苗免疫后2周,灭活苗免疫后3-4周,检测鸡只抗体水平,掌握免疫效果。
·产蛋期每月检测1次抗体水平,掌握鸡只抗体的消长规律,便于确定最佳免疫时机。
·鸡群发病当日及发病后2周检测,对比抗体水平变化情况,作为疾病诊断的参考。
不同阶段有效抗体的标准值
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琼脂扩散试验(AGP)
常用于鸡传染性法氏囊病(IBD)的抗体检测辅助诊断。AGP检测程序制定的原则为:
·1日龄检测,掌握雏鸡母源抗体水平,确定免疫时机;
·10-15日龄每天检测,抗体阳性率达60%-70%时首免;
·5-6周龄及时检测,掌握抗体上升趋势,确保抗体阳性率100%;
·种鸡产蛋期每月检测1次,抗体阳性率低于100%时及时补充免疫,确保雏鸡母源抗体水平。
二、常用抗体检测指标
抗体滴度:个体抵抗力
GMT:平均值,显示群体的平均抵抗力
CV%:变异系数(标准差S/平均值X),代表群体相对于平均值的离散程度。
三、抗体检测值的判断和解读
抗体值大小:如果抗体值大小接近有效保护阈值,说明有发病风险,需要尽快接种疫苗;如果抗体值大于发病阈值,说明已经有鸡只发病,或鸡群已经发病,需要采取控制措施。
离散度大小:离散度过大,说明鸡群疫病抗体值保护效果差异大,也说明鸡群对这个疫病抵御能力有差异,需要做免疫接种,或要加强管理警惕发病。一般抗体离散度在10%以内表示抗体整齐。
检测疫病抗体阳性率:如果出现阳性率低的情况,说明免疫接种过程中有漏防鸡只或有亚健康鸡只,预示着鸡群存在发病风险,要考虑补免。没有接种过疫苗的疫病,如果发现鸡群内有抗体,说明已经感染或发病。
四、抗体检测的注意事项
·采集的血样应具有代表性,采样点均匀分布。
·所采血样要及时检测,如不能及时检测,则要析出血清冷冻保存。
·新使用的抗原要检测效价,每次检测前要进行效价校正。
·实验室温度控制在20℃左右。室温过低,红细胞可能发生自凝现象;室温过高,会加快稀释液蒸发,产生偏差。
·保证检测仪器(96孔V型反应板、微量滴头、吸管及积液槽等)高度洁净,并做好移液器的校正,确保剂量准确。
·检测用的红细胞应来源于同一鸡群,一般取4只母鸡的血样,均匀混合即可。